细胞基础测定（CBA）为获取复杂且与生物学相关的数据提供了极大的便利。这些测定方法不仅可量化复合物的细胞毒性、生化机制、生物活性以及非靶标相互作用，有时甚至能实现同时检测。然而，CBA所蕴含的巨大潜力往往需要更多的实验设计和准备工作。这是因为在测量CBA时，往往会遇到一些传统生化检测所没有的额外考虑因素，比如检测实施和评估方面的差异。

本文将探讨CBA中可能遇到的一些挑战，并提出克服这些障碍的一些有效策略。使用MILE米乐的产品时，除了基本的温度控制，还可以自动调整检测设备内的CO₂和O₂浓度。这种功能可以将您的酶标仪转变为细胞培养箱，允许在保持细胞活力的前提下进行长达几天的活细胞动力学实验，使得基于细胞的实验结果更加具有生理学意义。

我们将重点关注在基于细胞的检测中可能出现的异质性问题。许多体外细胞培养物在进行微孔板读数时通常表现为异质样本。虽然有少数基于细胞的检测方法，如alamarBlue™或CellTiter-Glo®，其上清液中的染料是均一的，但大多数情况下细胞分布不均。尤其是在细胞密度较低时，整个孔的细胞信号往往会呈现不均匀分布，从而影响结果。

在执行测量之前，调整最佳焦距是至关重要的。在MILE米乐的酶标仪上，可以通过自动生成的焦距高度曲线来优化信号强度，这样即使焦距稍有偏差，数据质量也不会受到显著影响。当我们使用来自微孔板的底部光学器件时，理想的焦距一般应设置在0至3毫米之间，以确保最佳检测效果。

孔扫描在贴壁细胞的检测中同样不可忽视。细胞的分布不仅在Z平面上显著，在X/Y平面上也存在明显差异。如果只在孔的中心进行测量，可能会导致结果失真。为了应对这一挑战，MILE米乐提供了多种孔扫描选项，包括轨道、螺旋和矩阵扫描。这些选项可以覆盖整个孔的表面，获取多点测量，有效提高实验结果的重复性和可靠性。

通过使用矩阵扫描功能，我们能够获得孔内信号的局部分辨率，从而监测接种的均匀性和目标信号的局部变化，这在生物医学研究中尤为重要。该功能还能让研究者根据数据点的矩阵对每个孔进行多次测量，从而有效反映样本的真实分布。

综上所述，在处理细胞基础测定时，调整焦距和实施孔扫描是获得可靠数据的关键。通过采用MILE米乐的先进技术和产品，研究者可以显著提高数据的可重复性和信度，为生物医学领域的研究提供坚实基础。